| 反應(yīng)種屬 | 小鼠 |
| 檢測(cè)范圍 | 2.5pg/mL-40pg/mL |
| 物理性能 | 液體組分應(yīng)澄清，無(wú)沉淀或絮狀物；所有組分應(yīng)無(wú)包裝破損。 |
| 用途 | 定量檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織中小鼠降鈣素(CT)的含量。 |
| 實(shí)驗(yàn)原理 | 本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA法，往預(yù)先包被降鈣素(CT)抗體的微孔板中依次加入樣本/校準(zhǔn)品和Asaay Diluent，經(jīng)過(guò)溫育洗滌，再加入SA-HRP溫育。再次洗滌后加入底物TMB顯色，室溫顯色并用終止液終止反應(yīng)后讀取OD值。OD值高低和樣品中的降鈣素(CT)呈負(fù)相關(guān)。本試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、操作簡(jiǎn)單、快速等特點(diǎn)，對(duì)血清中降鈣素(CT)的減少或升高有可靠的檢出性能。 |
| 特異性 | 本試劑盒識(shí)別天然和重組小鼠降鈣素(CT)，與結(jié)構(gòu)類似物無(wú)交叉。 |
| 重復(fù)性 | 批內(nèi)變異系數(shù) CV%小于 15%，批間變異系數(shù) CV%小于 15%。 |
| 回收率 | 回收率在 85%-115%之間 |
| 試驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材 | 1、酶標(biāo)儀（450nm） 2、精密移液器及一次性吸頭 3、蒸餾水 4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī) 5、37℃水浴鍋或恒溫箱 6、500ml 量筒 |
| 操作程序 | 1. 將各種試劑移至室溫平衡兩小時(shí)，取濃縮洗滌液，根據(jù)當(dāng)批檢測(cè)數(shù)量，用蒸餾水 1：20 稀釋，混勻后備用。 2. 將預(yù)包被板從密封袋中取出，設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，不加任何液體；每個(gè)校準(zhǔn)品設(shè) 2 孔，每孔加入對(duì)應(yīng)校準(zhǔn)品 15μl；其余每個(gè)檢測(cè)孔直接加待測(cè)血清或質(zhì)控品 15μl。 3. 除空白孔外所有孔加入 Asaay Diluent 100μl，混勻，貼上封板膜，置 37℃溫育 60 分鐘。 4. 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置 10 秒甩干，重復(fù) 3 次后拍干。洗板機(jī)洗板：選擇洗滌 3 次程序洗板后拍干。 5. 每孔加入 SA-HRP 100μl（空白對(duì)照孔除外），混勻，貼上封板膜，置 37℃溫育 30 分鐘。 6. 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置 10 秒甩干，重復(fù) 3 次后拍干。洗板機(jī)洗板：選擇洗滌 3 次程序洗板后拍干。 7. 每孔加 TMB 100μl，振蕩混勻后，置 37℃避光顯色 15 分鐘，每孔加終止液 100μl。用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm，先用空白對(duì)照孔調(diào)零點(diǎn)，然后測(cè)定各孔光密度值（OD值）。 |
| 注意事項(xiàng) | 1：如果試劑盒的組份需要再次使用，請(qǐng)確保上一次使用之后沒(méi)有被污染。 2：酶標(biāo)板單次未使用完，要謹(jǐn)記密封放到 2-8℃保存。 |
| 問(wèn)題分析 | ①問(wèn)題描述：標(biāo)準(zhǔn)曲線差 可能原因及相應(yīng)對(duì)策： 1.試劑盒平衡時(shí)間不夠——不低于 2 個(gè)小時(shí)的室溫平衡 2.吸取及洗滌不充分——充分的吸取及洗滌 3.移液不精確——檢查和校正移液器 ②問(wèn)題描述：精密度低 可能原因及相應(yīng)對(duì)策： 1.洗滌不充分——按說(shuō)明書要求充分洗滌和浸泡 2.混勻不充分和吸取試劑不足——充分混勻和吸取試劑 3.重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜——使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的封板模 4.加樣不精確——檢查和校正移液器 ③問(wèn)題描述：O.D值低 可能原因及相應(yīng)對(duì)策： 1.每孔加的試劑量不精確——校正移液器，精確加入試劑 2.溫育時(shí)間不正確——保證充足的溫育時(shí)間 3.溫育溫度不正確——試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度 4.酶標(biāo)記物或底物失效——通過(guò)混合酶標(biāo)記物和底物，顏色迅速顯現(xiàn)來(lái)檢查 5.沒(méi)有加入終止液——按照說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)操作步驟加入終止液 6.超出讀數(shù)時(shí)間讀數(shù)——在說(shuō)明書推薦的讀數(shù)時(shí)間內(nèi)讀數(shù) ④問(wèn)題描述：樣本值 可能原因及相應(yīng)對(duì)策： 1.不正確的樣本儲(chǔ)存方式——正確儲(chǔ)存樣本，使用新鮮樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 2.不正確的樣本收集和處理方法——采取正確的樣本收集和處理方法 3.待測(cè)物質(zhì)在樣本中含量低——使用新鮮樣本，重復(fù)實(shí)驗(yàn) |
| 聲明 | 該試劑盒僅供研究使用，如將其用于臨床診斷或任何其他用途，我公司將不對(duì)因此產(chǎn)生的問(wèn)題負(fù)責(zé)，亦不承擔(dān)任何法律責(zé)任。 |
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